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三、實驗指標區域指標開臂1停留時間、活動路程、進入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)開臂2停留時間、活動路程、進入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)開臂3停留時間、活動路程、進入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)其他臂停留時間、活動路程、進入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)四、實驗方法及應用
1) 動物適應實驗環境1周后,稱重,禁食24小時。此后每天訓練結束后限制性地給予正常食料(據體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宮各臂及中央區分撒著食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時將4只動物置于迷宮中央(通往各臂的門打開)。讓其自由攝食、探究10min。
3) 第三天,重復第二天的訓練。這一過程讓動物在沒有很強的應激條件下熟悉迷宮環境。
4) 第四天起,動物單個進行訓練:在每個臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動物自由攝食。食粒吃完或10min后將動物取出。
5) 第五天,將食物放在食盒內,重復前一天的訓練,一天2次。
6) 第六天以后,隨機選4個臂,每個臂放一顆食粒;各臂門關閉,將動物放在迷宮中央;30s后,臂門打開,讓動物在迷宮中自由活動并攝取食粒,直到動物吃完所有4個臂的食粒。如經10min食粒仍未吃完,則實驗終止。每天訓練兩次,其間間隔1h以上。
siRNA 的作用原理
利用短寡核苷酸 siRNA 或能夠轉錄 siRNA 的 DNA 質粒將雙鏈 RNA (dsRNA) 引入細胞。細胞中的 Dicer 蛋白將 dsRNA 消化為 21 bp 的 dsRNA (siRNA)。 siRNA 被整合到 RNA 誘導沉默復合體 (RISC) 中。在 RISC 復合體中,dsRNA 發生鏈分離。其反義鏈與細胞中的互補/靶 mRNA 雜交?;罨?RISC 中的核酸酶降解靶 mRNA。斷裂的 mRNA 無法翻譯成蛋白質。也就是說蛋白質無法表達,從而成功“敲除”蛋白質。
急性肺yan:
急性肺yan是指肺部發生急性的yan癥反應,通常是由細菌、病毒或其他微生物gan染引起的。急性肺yan的主要癥狀包括發熱、咳嗽、咳痰、胸痛和呼吸困難。急性肺yan的嚴重程度因人而異,有些人可以在家中服用抗sheng素或抗病毒yao物zhi療,有些人則需要住院接受氧氣zhi療或人工呼吸器支持。急性肺yan如果不及時診斷和zhi療,可能會導致呼吸衰竭、敗xue癥、心臟驟停或si亡。
實驗材料
C57BL/6小鼠
LPS
方法步驟
1、小鼠禁食不禁水12h 。
2、使用戊ba比妥鈉(30mg/kg)腹腔ma醉,固定于板上
3、使用10mg/ml(50ul/只)的給藥劑量滴入小鼠咽喉壁,并捏住鼻子約20-30s后松開。
4、誘導后小鼠正常飼養觀察。實驗案例
給藥2小時后,HE染色開始出現炎細胞浸潤
6小時明顯炎細胞浸潤并肺泡壁增厚
12小時很少見到正常形態的肺泡結構
24小時肺泡壁明顯增厚