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3分鐘前 麗水臨床前動物實驗服務(wù)至上 南京英瀚斯生物科技[英瀚斯2eefa30]內(nèi)容:膿毒癥動物模型構(gòu)建方法總結(jié)高架十字迷宮行為學(xué)檢測:

實驗原理

高架十字迷宮(the elevated plus maze,EPM)是評價嚙齒類動物焦躁反應(yīng)的實驗方法 , 相較傷害性刺激所致小鼠焦躁行為檢測(如電刺激 、 噪聲刺激 、 飲食剝奪和暴露在捕食者氣味等), 該實驗具有操作簡單的優(yōu)點 , 能直觀反映小鼠的條件應(yīng)答 。 EPM實驗是在高架Y型迷宮的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的 。 EPM由開臂(open arms和閉臂(closed arms)各兩條組成 , 呈十字形交叉 , 交義部分為中央?yún)^(qū) , 距地面有一定高度 。其原理是由于面對新事物開臂 小鼠會產(chǎn)生好奇心去探究 , 而它們有嗜暗的天性(閉臂), 兩者之間發(fā)生探究與回避的沖突行為,產(chǎn)生焦躁心理。整個迷宮距離地面的高度相當(dāng)于人類站在懸崖邊,易導(dǎo)致動物產(chǎn)生恐懼不安的心理。可以通過對比小鼠在開臂和閉臂內(nèi)的滯留時間和路程來評價小鼠的焦躁行為。

EPM實驗在藥品開發(fā)和研究中得到廣泛的應(yīng)用:主要用于苯二氮卓類藥品的抗焦躁作用研究 及篩選具有抗焦l慮作用的新藥,也被用于研究精神性藥品濫用的影響及激s素的功能,應(yīng)激對生殖、衰老、妊s娠的影響等。抗焦l慮藥主要選擇性地抑制邊緣系統(tǒng) 的海馬、杏仁核 ,產(chǎn)生抗焦躁作用。

6. 八臂迷宮實驗方法根據(jù)實驗?zāi)康牡牟煌詫m臂的數(shù)目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動物記住探究過的臂也越小,動物的行為操作就越簡單。增加臂的數(shù)目一方面增加了對動物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過去的迷宮學(xué)習(xí)對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂迷宮,既可減少不必要的、過多臂的干擾,又可縮短訓(xùn)練和測試所花的時間。

7. 所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動物喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動物對固體食物吞咽的尤為實用。

8. 影響動物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀察者的恐懼與動物探究習(xí)性和已知放在迷宮臂內(nèi)食物的驅(qū)使。恐懼因素過強會阻止動物的迷宮操作,使動物始終停留在迷宮的某一個地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會產(chǎn)生類似結(jié)果,增加對動物的撫摸,必要時加高迷宮臂的側(cè)墻,有助于減少動物的恐懼。如食物的驅(qū)使作用不足,可減少食物量,但必須同時監(jiān)測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應(yīng)低于禁食前的80%;對多數(shù)大鼠,體重降低15%即可。

9. 與水迷宮不同,臂迷宮適合反復(fù)測試或長期記憶的測試。一般認(rèn)為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長期記憶。

膿毒癥動物模型構(gòu)建方法總結(jié)

膿毒癥:

是一種嚴(yán)重的全身性炎zheng反應(yīng)綜合征,是由感ran引起的機體免yi系統(tǒng)過度ji活和炎zheng反應(yīng)失控的疾病。免yi系統(tǒng)反應(yīng)過于激烈,導(dǎo)致炎zheng反應(yīng)泛濫,從而引發(fā)全身性炎zheng反應(yīng)綜合征。

常見膿毒癥造模方法:

1.細(xì)菌感ran:通過注射細(xì)菌或其產(chǎn)生的細(xì)菌毒su來誘導(dǎo)膿毒癥模型。常用的細(xì)菌包括大腸桿jun、金黃色葡萄球jun、肺yan克雷伯菌等。

2.LPS誘導(dǎo):脂多糖(LPS)是細(xì)菌外膜中的主要成分,具有強烈的mian疫ji活作用。可以通過注射LPS來誘導(dǎo)炎zheng反應(yīng)和膿毒癥模型。常用的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射或氣道暴露。

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