透射電子顯微鏡（Transmission Electron Microscope，TEM）是使用zui為廣泛的一類電鏡。通過發(fā)射電子束從而穿過超薄的樣品，同時與樣本相互作用，既而形成圖像。經(jīng)Masson染色后，膠原纖維呈現(xiàn)藍(lán)色，肌纖維紅色，細(xì)胞核藍(lán)黑色。透射電鏡具有分辨率高和放大倍數(shù)高的優(yōu)點(diǎn)。其分辨率為0.1-0.2nm，放大倍數(shù)為幾萬到幾十萬倍。目前透射電鏡已經(jīng)廣泛的應(yīng)用到癌zheng研究，病毒學(xué)研究，微生物學(xué)，細(xì)胞學(xué)研究等生物領(lǐng)域。

透射電鏡是以電子束透過樣品經(jīng)過聚焦與放大后所產(chǎn)生的物像，投射到熒光屏上或照相底片上進(jìn)行觀察。電子與樣品中的原子碰撞而改變方向，從而產(chǎn)生立體角散射。南京英瀚斯生物科技有限公司的團(tuán)隊(duì)實(shí)體組建于2013年，前期以“東極生物”運(yùn)營醫(yī)學(xué)科研外包業(yè)務(wù)，是南京國有資產(chǎn)監(jiān)督參股的，專注于醫(yī)學(xué)科研外包服務(wù)的國家高新技術(shù)企業(yè)。散射角的大小與樣品的密度、厚度相關(guān)，因此可以形成明暗不同的影像。由于電子易散射或被物體吸收，故穿透力低，必須制備超薄切片(通常為50-100 nm)。要在機(jī)體si亡后的數(shù)分鐘內(nèi)取材，組織塊要小(1mm3以內(nèi))，常用戊er醛和鋨suan雙重固定，包埋介質(zhì)包埋，用超薄切片機(jī)切成薄片，再經(jīng)醋酸鈾和檸檬酸鉛等進(jìn)行電子染色。

大鼠胃yan模型

【模型特點(diǎn)】模型成功率高，模擬了慢性萎縮型的多因素作用過程，與本病的發(fā)病機(jī)制有相似之處。病理以胃竇部病變?yōu)橹鳎袤w萎縮使胃黏膜變薄，但黏膜肌層相對增厚，大量炎性細(xì)胞浸潤，與臨床患者的膽汁反流性慢性萎縮型有較相似之處。

【模型評估和應(yīng)用】適用于慢性萎縮型各類的學(xué)觀察。不足之處是各種因素綜合作用，較難區(qū)分每種因素在發(fā)病中作用的大小。

病理實(shí)驗(yàn)外包常見染色介紹Warthin-Starry銀染：Warthin-Starry銀染染色原理在于螺旋體表面的黏蛋白與銀結(jié)合，呈黑色。

染色結(jié)果：菌絲及顆粒呈黑色，背景呈黃色。銀染一種是檢測聚酰胺凝膠中蛋白質(zhì)的方法，其原理是銀離子在堿性 pH 環(huán)境下被還原成金屬銀，沉淀在蛋白質(zhì)的表面上顯色。銀染的方法種類很多，有文獻(xiàn)報(bào)道的就有 100 多種。由于熒光素所發(fā)的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，從而可對抗原進(jìn)行細(xì)胞定位，并且可以通過熒光強(qiáng)度對檢測蛋白的表達(dá)量進(jìn)行半定量分析。但是其準(zhǔn)確的染色機(jī)制還不是特別地清楚。由于銀染的靈敏度很高，可染出膠上低于 1ng 的蛋白質(zhì)點(diǎn)，故廣泛地用在 2D 凝膠分析上，及極低蛋白含量測定的垂直凝膠中。主要是用于垂直凝膠電泳中低豐度蛋白的檢測，如內(nèi)源性GST-Pulldown、Co-IP等實(shí)驗(yàn)中相互作用蛋白的研究 。南京英瀚斯，的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。

病理實(shí)驗(yàn)外包，染色常見染色介紹天狼星紅染色：主要由天狼星紅染色液、Mayer 素染色液組成，主要用 于各種組織病變時對膠原纖維異常或纖維的研究中，在普通光學(xué)顯微鏡下心臟血管等組 織的膠原纖維被染成紅色，在偏振光鏡下對各種纖維化病變的分型和分級研究有一定的幫助 作用。病理染色-尼氏染色大鼠腦海馬區(qū)域尼氏染色尼氏染色可清晰的顯示出尼氏小體定位，判斷神經(jīng)細(xì)胞是否受損。采用組化技術(shù)也可顯示Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維，但所用昂貴，操作費(fèi)時，而采用 天狼星紅染色試劑便宜，操作簡單。

天狼星紅染色液操作步驟

1、組織固定于 10%固定液，常規(guī)脫水包埋。

2、切片厚 6μm，常規(guī)脫蠟至水。

3、天狼星紅染色液滴染 1h。

4、流水稍沖洗，去除切片表面染液。

5、Mayer 素染色液染細(xì)胞核 8～10min。

6、流水沖洗 10min。

7、常規(guī)脫水透明，中性樹膠封固。 天狼星紅染色可用作肝纖維化以及纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。南京英瀚斯，的病理染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)平臺。