原位雜交第二天

1.

1）將探針回收，放于－20C保存（通常探針可重復使用十次左右）。

2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。

3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。

4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。

2.

1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動。

2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時間為一小時。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。

結1核病是嚴重威脅人類健康的傳1染性疾病，每年約有200萬人死于該病，其死1亡率在傳1染性疾病中僅低于艾1滋病，隨著醫1療診斷技術的迅猛發展，結1核病病理診斷經歷了單一形態學和聯合特殊染色，到如今利用分子病理基因檢測技術進行準確診斷的三個階段。

我科早在全1國建立了系統性結1核病分子病理診斷技術的平臺，率1先將分子病理診斷技術在結1核病中應用并推廣，解決了傳統病理對菌陰肺結1核及肺外結1核病的診斷率低、結1核病與非結1核分枝桿1菌病無法鑒別以及耐藥結1核病無法診斷等難題。同時，我科作為中華醫學會結1核病學分會金1牌病理培訓基地，負責組織制定了結1核病病理診斷規范、培訓了大量的專1業技術人員，為形成結1核病病理學綜合診治新模式做出了卓1越貢獻!

1、組織取材：組織取材應盡可能新鮮。由于組織RNA降解較快，所以新鮮組織和培養細胞在30 min 內固定。

2、細胞組織固定目的與注意事項：

（1）保持細胞結構；

（2）大限度地保持細胞內DNA或RNA的水平；

（3）使探針易于進入細胞或組織。

常用的固定劑是多聚甲醛，與其它醛類固定劑不同，多聚甲醛不會與蛋白質產生廣泛的交叉連接，因而不會影響探針穿透入細胞或組織。