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酶標儀的工作原理
微處理機還通過控制電路控制機械驅(qū)動機構(gòu)X方向和Y方向的運動來移動微孔板,從而實現(xiàn)自動進樣檢測過程。而另一些酶標儀則是采用手工移動微孔板進行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅(qū)動機構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡單。
微孔板是一種經(jīng)事先包埋用于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內(nèi)都包埋著相應的抗原,微孔板上每個小孔可盛放零點幾毫升的溶液。
酶標儀的分類
光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來,所以植物呈現(xiàn)為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物的吸光值。
隨著檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學發(fā)光(Lum)。
酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長范圍內(nèi)的任意波長,而濾光片型酶標儀則根據(jù)選配的濾光片,只能截取特定波長進行檢測。
酶標儀的發(fā)展
在單通道酶標儀的基礎上又發(fā)展了多通道酶標儀,此類酶標儀一般都是自動化型的。它設有多個光束和多個光電檢測器,如 12個通道的儀器設有 12條光束或 12個光源,12個檢測器和12個放大器,在X方向的機械驅(qū)動裝置的作用下,樣品12個為一排被檢測.多通道酶標儀的檢測速度快,但其結(jié)構(gòu)較復雜價格也較高。
酶標儀的采購建議
測定的吸光度范圍通常,酶標儀的吸光度測定范圍在0~2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0~2.5之間,但現(xiàn)在基本上都做了拓寬,可達到3.5以上,并且能保持很好的精密度與線性。因此,對于酶標儀的吸光度范圍不必去刻意追求大的吸光度范圍,主要要看在一定的吸光度范圍內(nèi)的線性和精密度如何。
光學系統(tǒng),酶標儀的光學系統(tǒng)采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道,亦有單通道)檢測,一般為硅光管或光導纖維,除測定通道外,有的酶標儀還有一個參比通道,每次測定可進行自我校準。酶標儀的光學系統(tǒng)功能如何,均可通過酶標儀測定的吸光度范圍、線性度、精密度和準確度等體現(xiàn)出來。光學系統(tǒng)好的話,則上述指標也應較佳。測定的精密度與測定通道之間的均一性有直接關系。單通道可避免因通道不同所致的差異。