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公司基本資料信息
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意義
在研究DNA分子原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
通過分子檢測協助病理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學改變,對于病理常規染色難于診斷的這些腫1瘤,進行分子病理檢測可協助得出準確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態和免1疫組化的綜合判斷,但有些時候,這些手段也不能滿足診斷的需要,這時我們通過IG或TCR基因重排檢測,可協助鑒別淋巴細胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
滴加封閉液:37℃30分鐘。甩去多余液體,不洗。
.滴加生物素化鼠抗地1高辛:37℃ 60分鐘或室溫120分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。
滴加SABC:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×3次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗滌。
滴加生物素化過氧化物酶:37℃20分鐘或室溫30分鐘。原位雜交用PBS洗5分鐘×4次。
DAB顯色:使用DAB顯色試劑盒—1ml蒸餾水加顯色劑A,B,C各一滴,混勻,加至標本上。一般顯色20-30分鐘。若無背景出現則可繼續顯色。也可自配DAB顯色劑后顯色。充分水洗。
.蘇1木素復染,充分水洗。
酒精脫水,二甲1苯透明,封片。