大腸實驗方法原理

所謂大腸菌群，是指在37℃培養24h 內能發酵乳糖產酸、產氣的兼性厭氧的革藍氏陰性無芽孢的總稱。主要由腸科中四個屬內的細菌組成，即埃希氏屬、檸檬酸屬、克雷伯氏菌屬和腸屬。

水的大腸菌群數是指100 mL水檢樣內含有的大腸菌群實際數值，以大腸菌群近似數（MPN）表示。在正常情況下，腸道中主要有大腸菌群、糞鏈球菌和厭氧芽孢等多種細菌。這些細菌都可以隨人畜排泄物進入水源，由于大腸菌群在腸道內數量多，所以，水源中大腸菌群的數量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一項重要指標。目前，國際上已公認大腸菌群是糞便污染的指標。因而對飲用水必須進行大腸菌群的檢查。

大腸菌群檢測操作步驟

1 水樣稀釋

檢測所需水樣為100mL。若水樣污染嚴重，可對水樣進行稀釋。取10 mL水樣加入到90 mL無菌水中，必要時可加大稀釋度，水樣按照10倍逐級稀釋。

2 定性反應

用100 mL的無菌稀釋瓶量取100 mL水樣，加入培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解后，放入44.5℃的培養箱內培養24h。

3 51孔定量盤法

3.1 用100 mL的無菌稀釋瓶量取100 mL水樣，加入培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解。

3.2 將前述100mL水樣全部倒入51孔無菌定量盤內，以手撫平定量盤背面以趕除孔氣泡，然后用程控定量封口機封口。放入44.5℃的培養箱內培養24h。

3.3 無需稀釋檢測范圍：1-200MPN/100mL糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）

4 97孔定量盤法

4.1 將100mL水樣全部倒入97孔無菌定量盤內，其余步驟與6.3.1、6.3.2條款相同。

4.2 無需稀釋檢測范圍：1-2419MPN/100mL糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）

濾膜法(MF，membranefilter)濾膜法：是目前為流行的檢測水中大腸群的方法。濾膜法的具體步驟是首先將一定量的水體樣本注入0.45μm的濾膜過濾，經過抽濾，水中的細菌則被留在濾膜上，將濾膜貼于品紅亞硫酸鈉培養基上培養24h，溫度為恒溫37℃，這使得菌群因發酵乳糖而使得濾膜出現紫紅色，通過計算濾膜上的菌落進而計算出單位樣本中的大腸的數量。

用ISO9308－1規定的濾膜法測定水中大腸回收率均值為94.7%，批內變異系數小于10%，檢出限為500mL水樣可檢出1個CFU。該方法費用較低、原理簡單、利于推廣，但檢測時間相對較長、步驟繁瑣、干擾因素多，不適于大量樣品的分析，無法滿足污染物品快速檢測需求。