5分鐘前 染色體原位雜交檢測服務(wù)承諾守信 科銳諾生物科技[科銳諾44070b2]內(nèi)容：.雜交　（1） 盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2） 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應(yīng)緩緩搖動濾膜，防止它們粘在一起。（3） 用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片，以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強(qiáng)度和清晰度。（4） 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時用68℃，而在50%甲酰胺中雜交時用42℃）下，預(yù)雜交1-2小時。（5） 將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間，盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán)，以防液體蒸發(fā)。

首先，分子病理診斷為的診斷及鑒別診斷提供了依據(jù)，當(dāng)遇到少見疑難或罕見病例時，尤其是通過形態(tài)學(xué)和免yi組化染色仍不能確定的類型，這時候就需要借助分子病理技術(shù)，從基因水平來判斷疾病的異常情況，協(xié)助病理醫(yī)生作出相對準(zhǔn)確的診斷并判斷該疾病的預(yù)后及轉(zhuǎn)歸。應(yīng)用領(lǐng)域廣泛的要數(shù)軟組織和骨、淋巴造血系統(tǒng)，因為這些系統(tǒng)的相似而不同，單靠鏡下表現(xiàn)和已知的已無法滿足診斷需求。另外，分子病理檢測也常常運(yùn)用在分子分型中，比如大家熟知的分子分型，通過基因表達(dá)譜研究，可將分為管腔A型、B型，HER-2陽性型，基底樣型。

多彩色熒光原位雜交(multicolorfluorescenceinsituhybridization，mFISH)。它用幾種不同顏色的熒光素單獨或者混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交，能同時檢測多個基因，擴(kuò)大了FISH技術(shù)的臨床應(yīng)用。FISH技術(shù)目前主要應(yīng)用于染色體和DNA水平上的病理診斷檢測。染色體FISH主要檢測染色體易位、缺失、重復(fù)、變異等;DNAFISH主要是檢測基因突變、擴(kuò)增、易位、缺失。與原位雜交技術(shù)相比，F(xiàn)ISH更加安全、快速，特異性好、定位準(zhǔn)確。

水稻種子是人類重要的食物來源，其發(fā)育涉及一個復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，其中轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮了關(guān)鍵作用。MADS轉(zhuǎn)錄因子家族成員是植物花器1官發(fā)育的重要調(diào)控因子，已有的研究表明，幾乎所有的水稻MADS基因都在種子中表達(dá)，但對MADS家族成員參與水稻種子發(fā)育調(diào)控的研究結(jié)果仍比較少。

在這項研究中，研究組基于前期的表達(dá)譜研究基礎(chǔ)，分析得到了一個在水稻生殖發(fā)育階段優(yōu)先表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子MADS29。細(xì)致分析表明，MADS29在花藥、胚珠和種子中均表達(dá)，且在受精后的母體組織表達(dá)量高。MADS29的反義轉(zhuǎn)1基因植株呈現(xiàn)種子皺縮、淀粉粒形態(tài)異常、灌漿速率下降等表型。通過解剖學(xué)切片、末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記實驗和全基因組表達(dá)譜芯片分析等，研究人員證明了MADS29通過調(diào)控程序化死1亡(PCD)過程促進(jìn)珠心細(xì)胞和珠心突起處的降解。進(jìn)一步的體外凝膠阻滯實驗顯示，MADS29能夠通過直接結(jié)合程序化死1亡相關(guān)基因的啟動子區(qū)域而調(diào)控其表達(dá)，進(jìn)而影響胚乳發(fā)育。