6分鐘前 熒光原位雜交信賴推薦「貝科新肽」[貝科新肽a5f8c59]內(nèi)容:熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細胞遺傳技術(shù),以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

原位雜交技術(shù)(in situhybridization)是以標記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術(shù)。使含有特異序列、經(jīng)過標記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發(fā)生雜交,再以自顯影或細胞化學方法對標記探針進行探測,從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標本。也可以檢測組織芯片。

原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀60年代。1969年美國耶魯大學的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細胞雜交,將該基因進行定位,與此同時Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標記核酸探針進行了細胞或組織的基因定位,從而創(chuàng)造了原位雜交技術(shù)。自此以后,由于分子生物學技術(shù)的迅猛發(fā)展,特別是20世紀70年代末到80年代初,分子、質(zhì)粒和噬菌體DNA的構(gòu)建成功,為原位雜交技術(shù)的發(fā)展奠定了深厚的技術(shù)基礎(chǔ)。

植物原位雜交的應(yīng)用包括:
研究基因表達:通過觀察熒光信號的位置和數(shù)量,可以確定目標基因在植物組織中的表達模式和位置。
染色體定位:將目標基因與染色體中的特定位置進行比較,可以確定目標基因在染色體中的位置和分布。
基因:通過原位雜交技術(shù),可以確定目標基因的序列和位置,為基因提供重要的參考信息。
檢測物種或品種特異性:通過原位雜交技術(shù)可以檢測出不同物種或品種之間基因表達的差異,從而為物種或品種特異性研究提供依據(jù)。
遺傳育種:通過原位雜交技術(shù)可以檢測出不同品種之間基因表達的差異,從而為遺傳育種提供重要的參考信息。
