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分光光度計的工作原理
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分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
分光光度計使用過程中問題及解決方法
1) 測量過程中,“”點經常變動??赡茉颍?/p>
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致,或其表面有液滴。解決方法:用擦鏡紙擦干凈比色皿表面,然后將其安放在比色槽的左邊,上面用定位夾定位。
b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決方法:送修。
2)數顯不穩。可能原因:
a)預熱時間不夠。解決方法:延長預熱時間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因,長時間處于工作狀態時,也會工作不穩)。
b)光電管內的干燥劑失效,使微電流放大器受潮。解決方法:烘烤電路,并更換或烘烤干燥劑。
c)環境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法:改善工作環境。
d)光電管、電路等其它原因。解決方法:送修。
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分光光度計的應用范圍
超微量紫外可見分光光度計是一類很重要的分析儀器,無論在物理學、化學、生物學、醫學、材料學、環境科學等科學研究領域,還是在化工、環境檢測、冶金等現代生產與管理部門,超微量紫外可見分光光度計都有廣泛而重要的應用。超微量紫外可見分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析,常用于核酸,蛋白定量及細胞培養檢測;超微量紫外可見分光光度計已經是現代分子生物實驗室常規儀器。
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