分光光度計(jì)的工作原理

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分光光度計(jì)采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長(zhǎng)的光源，通過(guò)系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的光源，光線透過(guò)測(cè)試的樣品后，部分光線被吸收，計(jì)算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過(guò)被測(cè)物質(zhì)溶液時(shí)，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長(zhǎng)度）成正比，其關(guān)系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強(qiáng)度；

I 為透射的單色光強(qiáng)度；

T 為物質(zhì)的透射率；

k 為摩爾吸收系數(shù)；

L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長(zhǎng)；

c 為物質(zhì)的濃度；

分光光度計(jì)使用過(guò)程中問(wèn)題及解決方法

1) 測(cè)量過(guò)程中,“”點(diǎn)經(jīng)常變動(dòng)。可能原因：

a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。

b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)。解決方法：送修。

2)數(shù)顯不穩(wěn)。可能原因：

a)預(yù)熱時(shí)間不夠。解決方法：延長(zhǎng)預(yù)熱時(shí)間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長(zhǎng)時(shí)間處于工作狀態(tài)時(shí)，也會(huì)工作不穩(wěn))。

b)光電管內(nèi)的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。

c)環(huán)境振動(dòng)過(guò)大、光源附近空氣流速大、外界強(qiáng)光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。

d)光電管、電路等其它原因。解決方法：送修。

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分光光度計(jì)的應(yīng)用范圍

超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是一類很重要的分析儀器，無(wú)論在物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料學(xué)、環(huán)境科學(xué)等科學(xué)研究領(lǐng)域，還是在化工、環(huán)境檢測(cè)、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門(mén)，超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)都有廣泛而重要的應(yīng)用。超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析，常用于核酸，蛋白定量及細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)；超微量紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)已經(jīng)是現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。

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