5分鐘前 原位雜交檢測服務介紹「貝科新肽」[貝科新肽a5f8c59]內容：

原位雜交：

原位雜交是指用特定探針定位、檢測DNA、RNA的一種有效的實驗方法，通過把特點序列客隆到特殊載體上，通過轉錄酶反轉一條天然的RNA探針，將探針和切片樣品進行雜交，通過一系列顯色方法，來確定RNA或者DNA表達區域；本中心原位雜交探針采用的是第高辛和生物素標記，靈敏度和同位素相當。 我們采用roche標記及顯色試劑盒，GISH/ISH/FISH按照探針進行收費，每個試劑盒每條探針可以雜交60-80張玻片，收費為1萬5千元，GISH雜交因需要加抗淬滅劑每條探針收費為1萬9千元。量大優惠！

這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體，或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期，由于核酸分子雜交的特異性高，并可定位，因此該技術已被廣泛應用，例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響，因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便；同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸，對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性，并可完整地保持組織與細胞的形態，更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。

預雜交

1）每個管中置換成大約300ulHYB－溶液，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。

2）用等體積的HYB＋取代HYB－。

3）60℃水浴，預雜交4小時以上。

雜交

1）吸去預雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..

2）60℃ 溫浴過夜。

注：雜交與預雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結合越好，溫度越高，背景越小。