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低溫為什么可以進行生物樣品的保存？主要是因為：水份是生物樣品里的主要成份，而在深低溫，即溫度低于-８0℃，水存在晶體狀態和玻璃態２種物理方式。而從熱力學角度分析，水的這２種狀態的水分子都具有很高的粘度，并且幾乎不會擴展。水的這個在深低溫下幾乎不會擴散的特性為生物樣品的低溫保存提供了可能。深低溫狀態下水存在的晶體狀態和玻璃態２種狀態，低溫保存也同樣分為慢速降溫和快速降溫（玻璃化）２種方式。

快速降溫保存，即玻璃化方法就是用高濃度的冷凍稀釋液,以極快的速率降溫,使溶液內沒有足夠的時間形成冰晶核就直接轉變成無形態的玻璃樣固體的過程。此方法的優點是不用的程序控制降溫儀,操作簡便、快速,減輕損傷,但是由于在降溫過程中需要加入大量的冷凍保護劑，高達40-60%v/v,這些冷凍保護劑往往存在一定毒性會內部細胞，同時由于玻璃化過程中為了確保整個生物樣品的內部和外部均能實現快速降溫，需要減少樣品的尺寸、以及增加和外界超低溫環境（比如液氮）的接觸面積。因此這種暫時只適用于小尺寸、小計量生物樣品的保存，僅有ul單位。所以，目前大家還是通常采取慢速降溫進行低溫保存。

細胞冷凍保存,1. 材料：生長良好之培養細胞、新鮮培養基、DMSO (Sigma D-2650)、無菌塑料冷凍保存管(Nalgene　5000-0020)、0. 4%(w/v)trypan blue(GibcoBRL15250-061)、血球計數盤與蓋玻片、細胞凍存程序儀(也稱為程序降溫儀。冷凍保存方法：(1)傳統方法: 冷存管置于4 ℃10分鐘--->-20 ℃30分鐘--->-80 ℃ 16～18小時(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲存。-20 ℃不可超過1小時，以防止胞內冰晶過大，造成細胞大量，亦可跳過此步驟直接放入-80 ℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。(2)程序降溫：利用已設定程序的等速細胞凍存程序儀以-1～-3 ℃/分鐘之速度由室溫降至(-80 ℃以下)-120 ℃，再放在液氮槽vaporphase長期儲存。適用于懸浮型細胞與hybridoma之保存。