7分鐘前 西藏動物實驗室來電垂詢「在線咨詢」[英瀚斯2eefa30]內容：簡單介紹Agomir高架十字迷宮行為學檢測：

實驗原理

高架十字迷宮（the elevated plus maze,EPM）是評價嚙齒類動物焦躁反應的實驗方法 , 相較傷害性刺激所致小鼠焦躁行為檢測（如電刺激 、 噪聲刺激 、 飲食剝奪和暴露在捕食者氣味等）, 該實驗具有操作簡單的優點 , 能直觀反映小鼠的條件應答 。 EPM實驗是在高架Y型迷宮的基礎上發展而來的 。 EPM由開臂（open arms和閉臂（closed arms）各兩條組成 , 呈十字形交叉 , 交義部分為中央區 , 距地面有一定高度 。其原理是由于面對新事物開臂 小鼠會產生好奇心去探究 , 而它們有嗜暗的天性（閉臂）, 兩者之間發生探究與回避的沖突行為，產生焦躁心理。整個迷宮距離地面的高度相當于人類站在懸崖邊，易導致動物產生恐懼不安的心理。可以通過對比小鼠在開臂和閉臂內的滯留時間和路程來評價小鼠的焦躁行為。

EPM實驗在藥品開發和研究中得到廣泛的應用：主要用于苯二氮卓類藥品的抗焦躁作用研究 及篩選具有抗焦l慮作用的新藥,也被用于研究精神性藥品濫用的影響及激s素的功能,應激對生殖、衰老、妊s娠的影響等。抗焦l慮藥主要選擇性地抑制邊緣系統 的海馬、杏仁核 ,產生抗焦躁作用。

因 SP 是單只大鼠進行實驗且在實驗中大鼠的活動空間受限，故有學者認為以上的臨床與實驗室表現可能與大鼠的群體隔離或活動空間受限有關，進一步研究發現，在實驗前群體飼養的動物當與群體隔離后也會出現攻擊行為增加，血漿中 CORT 增加，功能抑制等表現。大鼠活動空間受限也可引起血漿中 CORT 的水平的增加，這些結果與單平臺睡眠剝奪實驗中見到的類似，為克服SP 中大鼠與群體分離及活動空間受限的缺點，在 SP 基礎上進一步發展為多平臺睡眠剝奪法。

1.2多平臺睡眠剝奪法

M P法于1981年先應用在大鼠睡眠剝奪實驗中，在 M P中為擴展大鼠的活動空間將臺由 SP 中的 1 個增加至 7 個，仍將1只大鼠放在臺間進行睡眠剝奪試驗，因大鼠可以在 7個臺間自由活動，故活動范圍較 SP 中有明顯增大。經實驗比較，在M P中反映應激增強的一些指標，如上腺重量增加和胸腺重量減少仍然存在，甚至在大鼠血液中 ACTH %CORT 的增加及上腺重量的增加較SP的更高，提示 M P較SP有更強的應激性!考慮到大鼠為群居動物，單只大鼠實驗易導致與所在群體的隔離。為克服群體隔離所帶來的應激反應，有學者將 M P 法進一步改良發展為改良多平臺睡眠剝奪法!

簡單介紹Agomiragomir的使用需要注意以下幾點：?agomir的設計需要參考miRbase數據庫中的微RNA序列，選擇合適的靶基因和靶組織。?agomir的劑量和給yao方式需要根據實驗目的和動物模型進行優化，一般建議從低劑量開始逐步增加，觀察效果和副作用。?agomir的效果持續時間一般為1周以上，甚至可達5-6周，因此需要合理安排實驗時間點和取樣方式。?agomir的使用需要配合相應的負對照（negative control），即沒有靶基因結合位點的隨機序列修飾物，以排除非特異性效應。?agomir的使用需要結合其他方法進行驗證，如RT-qPCR、Western blot、免mian疫組化等，以評估微RNA和靶基因表達水平的變化。