大鼠腦缺血-再灌注模型實(shí)驗(yàn)原理
大腦中動(dòng)脈(MCA)為臨床上發(fā)生腦缺血損傷zui常見(jiàn)的部位之一。故大腦中動(dòng)脈阻塞(MCAO)模型被廣泛用于局灶性腦缺血的研究。用血管內(nèi)線(xiàn)栓阻斷法制備大鼠 MCAO模型。已被腦血管病研究者廣泛接受和采用。
是研究局灶性腦缺血zui常用的造模方法。該方法利用尼龍線(xiàn)栓從一側(cè)頸總動(dòng)脈或頸外動(dòng)脈阻斷MCA供血造成局灶性腦缺血,缺血一定時(shí)間后回撤線(xiàn)栓,缺血區(qū)可通過(guò)腦底動(dòng)脈環(huán)由對(duì)側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈、椎基底動(dòng)脈和腦動(dòng)脈皮質(zhì)支的側(cè)支循環(huán)實(shí)現(xiàn)再灌注。
目前實(shí)驗(yàn)室較多采用MCA阻斷120min、0min及90min的短暫腦缺血-再灌注模型。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
(一)實(shí)驗(yàn)材料
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD雄性大鼠,體重250~300g,清潔級(jí)。
2.所需手術(shù)材料 器械盤(pán),3.6%水合氯醛,一次性5ml注射qi,尼龍魚(yú)線(xiàn)(直徑0.26mm,日本產(chǎn),按要求制好備用),備皮剪、小雜物盤(pán)、眼ke直剪,眼ke彎剪,眼ke直鑷,眼ke彎鑷,止血鉗,持針器,玻璃分針,手術(shù)縫針,0號(hào)手術(shù)線(xiàn),無(wú)菌棉簽,碘伏,生理鹽水等。
步驟
1.將縫合線(xiàn)切成大約 20 mm長(zhǎng)每段,對(duì)于體重 25-30g 的小鼠使用直徑為 0.21-0.22mm 的縫合線(xiàn)。
2.高壓滅菌手術(shù)器械,75% 酒精擦拭手術(shù)臺(tái)和相關(guān)設(shè)備進(jìn)行消毒。
3. 采用氣體麻zui(異fu烷),將鼠置于仰臥位,放在加熱墊上,檢測(cè)體溫在 36.5-37.5°C 之間。
4.使用電動(dòng)剃毛器將頸部的毛發(fā)剔除,暴露皮膚。用 75% 酒精消毒手術(shù)部位三次。
5.在立體解剖顯微鏡下,在頸部開(kāi)一個(gè) 1cm 長(zhǎng)的中線(xiàn)切口,使用牽開(kāi)器暴露手術(shù)區(qū)域,并識(shí)別右側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA),頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。仔細(xì)分離動(dòng)脈,使其脫離周?chē)窠?jīng)和筋膜。進(jìn)一步將ECA 和甲狀腺上動(dòng)脈(STA)分支用電凝筆凝固。在凝固段切斷 ECA 和 STA。
zhong風(fēng)和腦缺血模型在zhong風(fēng)這種疾病中,主要癥狀為流向大腦的血液不足導(dǎo)致細(xì)胞si亡。
zhong風(fēng)分為兩大類(lèi):缺血性(腦缺血)和出血xing(蛛網(wǎng)膜下腔出血和腦出xue)。
腦缺血是指沒(méi)有足夠的腦血流滿(mǎn)足代謝需要,導(dǎo)致腦缺氧,從而導(dǎo)致腦梗死/缺血性zhong風(fēng)。缺血有兩種類(lèi)型:局限于大腦特定區(qū)域的局灶性缺血;
以及全腦缺血,包括腦組織的廣泛區(qū)域。
大約87%的zhong風(fēng)是缺血性的,其余是出血xing的。
大多數(shù)zhong風(fēng)實(shí)驗(yàn)都使用小型動(dòng)物(例如小鼠,大鼠,兔子)。因?yàn)樗鼈儽却笮蛣?dòng)物具有明顯的優(yōu)勢(shì):從倫li的角度來(lái)看,成本更低,可接受性更高。其中,大鼠是zui常用的動(dòng)物之一:與人的腦血管和生理特性相似,適合的腦尺寸小,易于進(jìn)行可重復(fù)的研究。