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色譜柱的活化步驟:
1. 在保持柱濕潤(rùn)的情況下,用(如或)洗滌柱子。例如,在開(kāi)始使用柱子之前,要用3-5倍柱子體積的洗滌一下柱子。
2. 將純水通過(guò)柱子流通20-30min。這一步可以去除殘留的有機(jī)化合物和雜質(zhì)。注意保持柱子濕潤(rùn)。
3. 通過(guò)柱子流通一定比例的與水混合物(例如:70%+30%水)。這樣可以逐漸增加有機(jī)相的濃度,有助于保護(hù)柱子不被溶劑沖擊。
4. 接著,可以使用一定比例的溶解樣品,并以柱洗滌液的方式通過(guò)柱子。可以考慮用一些柱洗滌液去除樣品殘留。
5. 后,洗滌柱子以消除任何殘留的溶液,或?qū)⒅哟娣旁谝欢ǖ木彌_液/中,直到再次使用。
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液相色譜柱的五大填裝方法
1.高壓勻漿法裝填
2.濕法裝填
3.干法裝填
4.等密度法裝填
5.高粘度法裝填
目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室是購(gòu)買(mǎi)商品預(yù)填裝柱來(lái)滿足分離、分析之需。液相色譜柱、特別是液相色譜柱的填裝,需要有較高的技巧和熟練的技能。因此,有人甚至將“裝柱”看作是“藝術(shù)加技術(shù)”。
但是只要掌握了一些基本的規(guī)律和方法,任何實(shí)驗(yàn)室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。
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①高壓操作的安全問(wèn)題。常發(fā)生的問(wèn)題是柱子與勻漿罐連接不牢,造成加壓時(shí)柱頭被高壓沖下或柱子從勻漿罐上滑脫。此時(shí),輕則填裝失敗,材料損失,重則造成人身傷害事故,一定要加以防范。除每次填裝前均須仔細(xì)確認(rèn)是否連接正確且牢靠外,還可加上由法蘭盤(pán)和長(zhǎng)螺桿組成的預(yù)防脫落裝置,以防萬(wàn)一。
②通常,先填裝的柱床較后填裝的柱床緊密。因此,當(dāng)使用時(shí)宜以相反的方向?yàn)橐耍醋尳鼊驖{罐一端作為使用時(shí)流動(dòng)相的出口,而填裝時(shí)的出口端則作為流動(dòng)相的入口。
③新柱子使用前應(yīng)以甲i醇沖洗20-30min, 后,再改用流動(dòng)相平衡。
④新柱子宜選適宜的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行評(píng)價(jià)并記錄,以備存查和比較。
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