高架十字迷宮試驗 ：

EPM ) 既可以建立焦躁應激的模型也是國際上公認的經(jīng)典測量焦躁反應的方法。其原理是利用動物對新異環(huán)境的探究特性和對高懸敞開臂的恐 懼心理, 形成動物的矛盾沖突來考察大鼠的焦躁狀態(tài)。 EPM 測試的項目中, 焦躁動物的 OE% 和 OT% 會明顯降低, 經(jīng)典抗焦躁藥則使兩者升高, OE + CE 反映了動物的運動活性。本研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠的 OE% 和 OT% 顯著下降, 運動活性也降低。HD反映了動物在非保護區(qū)內(nèi)的探索行為, 代表動物對陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避, 與焦躁程度有一定相關性, 本研究中空瓶應激后的大鼠 HD行為減少; RR可用來觀察藥有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強度。上述結(jié)果證實, 慢性應激后的大鼠明顯處于焦躁狀態(tài), 說明慢性焦躁應激大鼠模型的制備成功, 且通過量化的標準客觀反映出大鼠的焦l慮程度。

一、實驗概述

八臂迷宮（radial arm maze）實驗是為常用的評價動物學習記憶能力的模型之一，由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據(jù)是，控制進食的動物受食物的驅(qū)使對迷宮各臂進行探究，經(jīng)過一定時間的訓練，動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測定動物的工作記憶（working memory）和參考記憶（reference memory）。八臂迷宮操作簡便、可行，而且能區(qū)分短期的工作記憶和長期的參考記憶，現(xiàn)已被廣泛用于學習記憶功能評價。

二、實驗儀器

灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng)，其他組織意義不是很大，而且耗時耗力。對神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個灌流固定的過程就完成了。

灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng)，其他組織意義不是很大，而且耗時耗力。對神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好！

小鼠灌注

灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半，這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白，針頭要從心軸方向進針，然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了，開始灌流后剪破右心耳，約 40 毫升生理鹽水，后再灌流約 20 毫升多聚甲醛，整個灌流固定的過程就完成了。

大鼠慢性造模SOP

一、實驗材料

水合氯醛

標準致病大腸埃希菌

手術縫線

SD大鼠（雄性，6周齡）

二、實驗方法

2.1大腸埃希菌37℃血瓊脂培養(yǎng)12h,然后使用生理鹽水配置濃度為1.5×108/mL的菌液，將菌液與0.2%瓊脂1:1混合備用。

2.2常規(guī)消毒手術器械，使用10%水合氯醛(0.4mL/100g)腹腔注射大鼠，備皮并消毒手術部位。在下腹正中做長度約1-1.5cm縱向切口，bao露膀胱，然后輕輕拉出膀胱，可以觀察到膀胱后頸部的（雙葉）。將輕輕夾起，用1mL向內(nèi)注入菌液瓊脂混合物（每葉各0.1mL），縫合切口，常規(guī)飼養(yǎng)4周。