高架十字迷宮試驗 :
EPM ) 既可以建立焦躁應(yīng)激的模型也是國際上公認的經(jīng)典測量焦躁反應(yīng)的方法。其原理是利用動物對新異環(huán)境的探究特性和對高懸敞開臂的恐 懼心理, 形成動物的矛盾沖突來考察大鼠的焦躁狀態(tài)。 EPM 測試的項目中, 焦躁動物的 OE% 和 OT% 會明顯降低, 經(jīng)典抗焦躁藥則使兩者升高, OE + CE 反映了動物的運動活性。本研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠的 OE% 和 OT% 顯著下降, 運動活性也降低。HD反映了動物在非保護區(qū)內(nèi)的探索行為, 代表動物對陌生環(huán)境的好奇探究或因恐懼而尋求逃避, 與焦躁程度有一定相關(guān)性, 本研究中空瓶應(yīng)激后的大鼠 HD行為減少; RR可用來觀察藥有無鎮(zhèn)靜作用及鎮(zhèn)靜強度。上述結(jié)果證實, 慢性應(yīng)激后的大鼠明顯處于焦躁狀態(tài), 說明慢性焦躁應(yīng)激大鼠模型的制備成功, 且通過量化的標準客觀反映出大鼠的焦l慮程度。
一、實驗概述
八臂迷宮(radial arm maze)實驗是為常用的評價動物學(xué)習(xí)記憶能力的模型之一,由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據(jù)是,控制進食的動物受食物的驅(qū)使對迷宮各臂進行探究,經(jīng)過一定時間的訓(xùn)練,動物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時測定動物的工作記憶(working memory)和參考記憶(reference memory)。八臂迷宮操作簡便、可行,而且能區(qū)分短期的工作記憶和長期的參考記憶,現(xiàn)已被廣泛用于學(xué)習(xí)記憶功能評價。
二、實驗儀器
灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng),其他組織意義不是很大,而且耗時耗力。對神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
灌注固定主要用于神經(jīng)系統(tǒng),其他組織意義不是很大,而且耗時耗力。對神經(jīng)系統(tǒng)防止變性效果較好!
小鼠灌注
灌流固定小鼠時一般采用輸液器的針頭 (4 號半,這樣肉眼可見就是肺部明顯充氣脹大變白,針頭要從心軸方向進針,然后刺入心尖 3~4 毫米左右就可以了,開始灌流后剪破右心耳,約 40 毫升生理鹽水,后再灌流約 20 毫升多聚甲醛,整個灌流固定的過程就完成了。
大鼠慢性造模SOP
一、實驗材料
水合氯醛
標準致病大腸埃希菌
手術(shù)縫線
SD大鼠(雄性,6周齡)
二、實驗方法
2.1大腸埃希菌37℃血瓊脂培養(yǎng)12h,然后使用生理鹽水配置濃度為1.5×108/mL的菌液,將菌液與0.2%瓊脂1:1混合備用。
2.2常規(guī)消毒手術(shù)器械,使用10%水合氯醛(0.4mL/100g)腹腔注射大鼠,備皮并消毒手術(shù)部位。在下腹正中做長度約1-1.5cm縱向切口,bao露膀胱,然后輕輕拉出膀胱,可以觀察到膀胱后頸部的(雙葉)。將輕輕夾起,用1mL向內(nèi)注入菌液瓊脂混合物(每葉各0.1mL),縫合切口,常規(guī)飼養(yǎng)4周。