早的細(xì)胞培養(yǎng)器皿是由玻璃制作的。由于玻璃的表面是親水的,不經(jīng)過(guò)特殊的處理,普通的細(xì)胞就可以貼附生長(zhǎng)。
聚透光性能好,具有較好的強(qiáng)度和易塑性,并且沒(méi)有毒性,成為一次性細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)胞培養(yǎng)板等一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材的材料(一般的磁帶和CD盒也是用聚制成的)。然而聚表面是疏水的,所以需要經(jīng)過(guò)表面的改性處理,變成親水后才能適用于細(xì)胞培養(yǎng)。
培養(yǎng)細(xì)胞在木貼附于底物之前一般均似球體樣;當(dāng)與底物貼附后,細(xì)胞將逐漸伸展而形成一定的形 態(tài),呈成纖維細(xì)胞樣或上皮細(xì)胞樣等。細(xì)胞附著于底物時(shí)并非一-種需要能量的過(guò)程,一般認(rèn)為與電荷有關(guān)。據(jù)資料記載,37°C時(shí)在2min內(nèi)細(xì)胞之間即可形成鍵,該鍵可對(duì)0. 01%胰蛋白酶起作用且僅發(fā)生于細(xì)胞之間,而細(xì)胞與底物之間則無(wú); 8 min后才有穩(wěn)定的鍵形成。
細(xì)胞的性(cell totipotency)是指單個(gè)細(xì)胞在一定條件下分化發(fā)育成為完整個(gè)體的能力,具有這種能力的細(xì)胞稱為性細(xì)胞(totipotent cell)。此種現(xiàn)象在植物和低等動(dòng)物中較常見(jiàn)。如某些植物的單個(gè)體細(xì)胞,經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)后,可分裂成許多細(xì)胞,生長(zhǎng)成一個(gè)完整的植株。利用細(xì)胞性,可進(jìn)行無(wú)性繁殖。
一個(gè)性的細(xì)胞,應(yīng)該具有表達(dá)其基因組中任何一種基因的能力,亦即能分化為該種生物體內(nèi)任何一種類(lèi)型的細(xì)胞。理論上,每個(gè)配備了完整基因組的細(xì)胞,包括體細(xì)胞和生殖細(xì)胞,都應(yīng)該是性的。但實(shí)際不然,往往是體細(xì)胞表達(dá)基因的能力比性細(xì)胞要低得多。生殖細(xì)胞,尤其是卵細(xì)胞,盡管分化程度很高,仍然具有較大的潛在性,在某些條件下可進(jìn)行孤雌生殖,由一個(gè)卵細(xì)胞分化成所有各種類(lèi)型的細(xì)胞。生殖細(xì)胞的結(jié)合產(chǎn)物──受精卵則表出高的性,任何一個(gè)生物體(無(wú)性繁殖后代除外)都由合子起源,由此,個(gè)體中的每一個(gè)形態(tài)和機(jī)能各異的細(xì)胞都是合子產(chǎn)生后代的分化產(chǎn)物。
2、貼壁細(xì)胞如何分離下來(lái)?
如果把貼壁的細(xì)胞洗下來(lái)常用的辦法就是加入胰蛋白酶消化,37°C環(huán)境下放置3~5min便可,但是殘留培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的胰蛋白酶對(duì)細(xì)胞有毒性作用,所以都會(huì)添加低濃度的以中和胰蛋白酶的。用超聲的辦法也可以把細(xì)胞分離下來(lái),但是要注意超聲的頻率不能太大,而且細(xì)胞很嬌嫩,超聲會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的。這是由細(xì)胞的性質(zhì)特點(diǎn)決定的。