7分鐘前 水稻RNA原位雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù)來(lái)電洽談「科銳諾」[科銳諾44070b2]內(nèi)容：

原位雜交第三天

1） 用1ml含10%熱滅清的MABT溶液置換溶液，放置搖床上25分鐘，然后用1mlMABT置換，25分鐘，再用1mlMABT溶液置換，一小時(shí)以上，后用1mlMABT溶液置換，25分鐘。

2） 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次，每次放置五分鐘。

3）將胚胎轉(zhuǎn)入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul BM Purple AP Substrate（底物，用之前加5mM左旋米唑），十六孔板外面包上錫箔紙以避光，避免搖動(dòng)，室溫下顯色。

4）每隔一小時(shí)觀察胚胎是否開(kāi)始顯色

5）將顯色完全的胚胎中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加上4%多聚甲醛固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

近年來(lái)基因檢測(cè)在結(jié)1核病診斷中應(yīng)用越來(lái)越廣泛，但主要應(yīng)用于痰液等新鮮標(biāo)本，在石蠟包埋組織標(biāo)本中應(yīng)用非常少。我們建立了利用熒光定量PCR及膜探針雜交法鑒別診斷結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病的分子病理檢測(cè)方法；建立了利用高分辨溶解曲線法檢測(cè)1線抗結(jié)1核核1心藥1物利福平及異煙肼的耐藥情況的分子病理檢測(cè)方法。我們?cè)谑锥寂R床醫(yī)學(xué)發(fā)展專項(xiàng)的資助下進(jìn)行大樣本臨床驗(yàn)證。這些方法也將陸續(xù)轉(zhuǎn)化為我院分子病理診斷項(xiàng)目。

目前，我國(guó)已穩(wěn)定開(kāi)展的分子病理技術(shù)主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、基因芯片和DNA測(cè)序技術(shù)DNA原位雜交主要用于基因定位、特異基因(如病原微生物基因)檢測(cè)等;RNA原位雜交則用于基因表達(dá)檢測(cè)。原位雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，可直接定位組織，價(jià)格低廉，信號(hào)穩(wěn)定，儲(chǔ)存方便，可做組織學(xué)評(píng)價(jià)，是目前應(yīng)用較多的分子病理技術(shù)之一。

基因芯片又稱DNA芯片或DNA微陣列。其原理是在固體載體(硅片、玻片、硝1酸纖維素膜)上按照特定的排列方式集成大量已知DNA/cDNA片段，形成DNA/cDNA微矩陣。 　　基因芯片技術(shù)是一門新興的技術(shù)，由于該技術(shù)能在一次實(shí)驗(yàn)中自動(dòng)、快速、敏感地同時(shí)檢測(cè)數(shù)千條序列，而且獲得的序列信息高度特異、穩(wěn)定。根據(jù)探針類型分為DNA芯片和cDNA芯片，前者用于檢測(cè)基因突變，實(shí)現(xiàn)腫1瘤早期診斷、判斷預(yù)后及治1療;后者用于檢測(cè)基因表達(dá)，對(duì)腫1瘤進(jìn)行發(fā)現(xiàn)性分類和預(yù)測(cè)性分類。