地表水中快速檢測(cè)糞大腸菌群的方法

想要知道地表水是否受到了糞水污染以及污染的程度如何，糞大腸菌群是一項(xiàng)非常重要的參數(shù)。因此如何能夠快速、可靠、準(zhǔn)確地檢測(cè)出糞大腸菌群含量對(duì)水質(zhì)健康具有重要意義。

今天我們要講的是通過光度法快速檢測(cè)地表水中糞大腸菌群的操作方法，此方法原理是通過一定量的水樣與選擇性培養(yǎng)基混合均勻放置于44.5℃環(huán)境下，糞大腸菌群產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，并分解色原底物釋放出色原體使培養(yǎng)基呈現(xiàn)顏色變化，通過連續(xù)分光光度（波長(zhǎng)：300nm～600nm）測(cè)定，依據(jù)待測(cè)水樣色度變化與水中糞大腸菌群數(shù)成一定關(guān)系的原理，得出糞大腸菌群濃度。

酶底物法封口機(jī)檢測(cè)優(yōu)勢(shì)

1.無需在無菌室內(nèi)操作。

2.手工操作時(shí)間小于1分鐘。

3.無需培養(yǎng)基制備和大量玻璃器皿滅菌。

4.24小時(shí)即可完成定性定量分析，無需驗(yàn)證試驗(yàn)。

操作方法

一：將水樣加入100ml取樣瓶中，加入酶底物法檢測(cè)試劑，擰緊蓋子搖勻至完全溶解。

二：將樣品加到定量檢測(cè)盤中。

三：使用程控定量封口機(jī)對(duì)定量檢測(cè)盤進(jìn)行樣品分配及封口。

四：將封口好的定量檢測(cè)盤放在36±1℃，如需測(cè)定糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）則將培養(yǎng)箱設(shè)定為44.5℃，培養(yǎng)24h。

五：對(duì)照比色盤數(shù)陽性（顯黃色，或熒光）格子數(shù)，按照使用的檢測(cè)盤類型，分別查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大腸菌群的菌群數(shù)，對(duì)照MPN表出數(shù)據(jù)。

六：根據(jù)稀釋倍數(shù)結(jié)果按公式計(jì)算結(jié)果大腸菌群(個(gè)/L)=MPN值×稀釋倍數(shù)×1000mL/100mL。

酶底物法檢測(cè)工作原理酶底物法使用ONPG和MUG兩種營養(yǎng)生長(zhǎng)指示劑，其中ONPG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會(huì)被總大腸菌群產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無色變?yōu)辄S色，在44.5℃的培養(yǎng)基中會(huì)被糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無色變?yōu)辄S色，MUG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會(huì)被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的特異性β-葡糖醛酸酶分解代謝，使水樣在紫外燈下發(fā)出熒光，從而實(shí)現(xiàn)水質(zhì)大腸菌群的檢測(cè)。

1、大腸是細(xì)菌，屬于原核生物;具有由肽聚糖組成的細(xì)胞壁，只含有核糖體簡(jiǎn)單的細(xì)胞器，沒有細(xì)胞核，只有擬核;細(xì)胞質(zhì)中的質(zhì)粒常用作基因工程中的運(yùn)載體。

2.大腸的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。

也稱粘附素，即大腸的菌毛。致病大腸須先粘附于宿主腸壁，以免被腸蠕動(dòng)和腸分泌液清除。因此在大腸的中可以適當(dāng)家一部分表面活性劑增效。也可以通過口服大量有益菌進(jìn)行搶先占位。3.動(dòng)物體與大腸的關(guān)系：在不致病的情況下(正常狀況下)，可認(rèn)為是互利共生;在致病的情況下，可認(rèn)為是寄生。