地表水中快速檢測糞大腸菌群的方法

想要知道地表水是否受到了糞水污染以及污染的程度如何，糞大腸菌群是一項非常重要的參數(shù)。因此如何能夠快速、可靠、準確地檢測出糞大腸菌群含量對水質健康具有重要意義。

今天我們要講的是通過光度法快速檢測地表水中糞大腸菌群的操作方法，此方法原理是通過一定量的水樣與選擇性培養(yǎng)基混合均勻放置于44.5℃環(huán)境下，糞大腸菌群產(chǎn)生β-半乳糖苷酶，并分解色原底物釋放出色原體使培養(yǎng)基呈現(xiàn)顏色變化，通過連續(xù)分光光度（波長：300nm～600nm）測定，依據(jù)待測水樣色度變化與水中糞大腸菌群數(shù)成一定關系的原理，得出糞大腸菌群濃度。

酶底物法封口機檢測優(yōu)勢

1.無需在無菌室內(nèi)操作。

2.手工操作時間小于1分鐘。

3.無需培養(yǎng)基制備和大量玻璃器皿滅菌。

4.24小時即可完成定性定量分析，無需驗證試驗。

操作方法

一：將水樣加入100ml取樣瓶中，加入酶底物法檢測試劑，擰緊蓋子搖勻至完全溶解。

二：將樣品加到定量檢測盤中。

三：使用程控定量封口機對定量檢測盤進行樣品分配及封口。

四：將封口好的定量檢測盤放在36±1℃，如需測定糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）則將培養(yǎng)箱設定為44.5℃，培養(yǎng)24h。

五：對照比色盤數(shù)陽性（顯黃色，或熒光）格子數(shù)，按照使用的檢測盤類型，分別查51孔或者97孔MPN表得出100毫升中大腸菌群的菌群數(shù)，對照MPN表出數(shù)據(jù)。

六：根據(jù)稀釋倍數(shù)結果按公式計算結果大腸菌群(個/L)=MPN值×稀釋倍數(shù)×1000mL/100mL。

酶底物法檢測工作原理酶底物法使用ONPG和MUG兩種營養(yǎng)生長指示劑，其中ONPG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會被總大腸菌群產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無色變?yōu)辄S色，在44.5℃的培養(yǎng)基中會被糞大腸菌群(耐熱大腸菌群)產(chǎn)生的特異性β-半乳糖苷酶分解代謝，使水樣從無色變?yōu)辄S色，MUG試劑在36℃的培養(yǎng)基中會被大腸埃希氏菌產(chǎn)生的特異性β-葡糖醛酸酶分解代謝，使水樣在紫外燈下發(fā)出熒光，從而實現(xiàn)水質大腸菌群的檢測。

1、大腸是細菌，屬于原核生物;具有由肽聚糖組成的細胞壁，只含有核糖體簡單的細胞器，沒有細胞核，只有擬核;細胞質中的質粒常用作基因工程中的運載體。

2.大腸的代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。

也稱粘附素，即大腸的菌毛。致病大腸須先粘附于宿主腸壁，以免被腸蠕動和腸分泌液清除。因此在大腸的中可以適當家一部分表面活性劑增效。也可以通過口服大量有益菌進行搶先占位。3.動物體與大腸的關系：在不致病的情況下(正常狀況下)，可認為是互利共生;在致病的情況下，可認為是寄生。