實驗動物的除毛
一、實驗動物的除毛
在動物實驗中,被毛有時會影響實驗操作與觀察,因此必須除去。除去被毛的方法有剪毛、拔毛、剃毛和脫毛等。
(一)剪毛法:剪毛法是將動物固定后,先用蘸有水的紗布把被毛浸濕,再用剪毛剪刀緊貼皮膚剪去被毛。不可用手提起被毛,以免剪破皮膚。剪下的毛應(yīng)集中放在一容器內(nèi),防止到處飛揚。給狗、羊等動物采血或新牛放血制備常用此法。
(二)拔毛法:拔毛法是用拇指和食指拔去被毛的方法。在兔耳緣靜脈注she或尾靜脈注she時常用此法。
(三)剃毛法:剃毛法是用剃毛刀剃去動物被毛的方法。如動物被毛較長,先要用剪刀將其剪短,再用刷子蘸溫肥皂水將剃毛部位浸透,然后再用剃毛刀除毛。本法適用于暴露手術(shù)區(qū)。
(四)脫毛法:脫毛法是用化學(xué)藥品脫去動物被毛的方法。首先將被毛剪短,然后用棉球蘸取脫毛劑,在所需部位涂一薄層,2~3分鐘后用溫水洗去脫落的被毛,用紗布擦干,再涂一層油脂即可。
適用于狗等大動物的脫毛劑配方為:10g,生石灰15g,溶于100ml水中。
適用于兔、鼠等動物的脫毛劑的配方為:1. 3g,肥皂粉1g,淀粉7g,加適量水調(diào)成糊狀;2. 8g,淀粉7g,糖4g,甘油5g,硼砂1g,加水75ml;3. 8g溶于100ml水中。
營養(yǎng)不良性gan硬化動物模型
(1)fu制方法離乳雄性大鼠,每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8~10g,連續(xù)2~3個月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來源,另加蔗糖、豬油、維生素粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過程中,每日觀察動物的一般活動狀況,每周稱量動物體重,造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱取部分肝組織制備勻漿作生化檢測,摘取一些qi官稱重,換算成臟器系數(shù),并對肝組織進行組織形態(tài)學(xué)檢查。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時,用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置于左手掌心、無名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠固定。
(2)模型特點造模1個月時,約有20%動物si亡,2個月時,動物體重增長停止,有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn),巨檢可見典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀,有的還出現(xiàn)shen硬化,光鏡檢查顯示,造模初期,肝組織呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化,隨著飼育時闖的延長,出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。如果動物編號是二位數(shù)或三位數(shù),那相應(yīng)的用二種或三種不同的顏色,不同顏色代表不同位數(shù)(個位、十位、百位),標(biāo)記的原則同上。
(3)比較醫(yī)學(xué)膳食不平衡或特種營養(yǎng)素缺乏可以導(dǎo)致動物肝細胞病變。實驗證明,長期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對dan堿的需求量較大,因dan堿缺乏造成對機體傷害的敏感性自然比成年動物更強。但事實上,對dan堿缺乏的敏感性取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類gan臟不含dan堿氧化酶,不存在dan堿缺乏問題,所以此模型不適于在發(fā)病機制上進行人類相關(guān)疾病的研究。不過,該模型由于fu制周期長,飼料配制復(fù)雜,花費大,現(xiàn)已少見有單用此方法造模者。此外,實驗中使用雄性動物雄鼠是因為雄性動物在向gan硬化轉(zhuǎn)化過程中比雌性動物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進gan硬化發(fā)展的作用。將動物固定,顯露尾部,將尾塵剪去約5mm,從尾根部向尾端部,血即從斷端流出。
大鼠癲xian模型
利用yao物制備癲xian模型(yao物建模)
zhu射yao物,通過破壞腦部神經(jīng)遞質(zhì)釋放的平衡,阻斷興奮性氨基酸的循環(huán)通路,誘發(fā)dian癇發(fā)生。
1注she合成紅藻氨酸制備大鼠dian癇模型紅藻氨酸(kainic acidKA)是海藻的提取物,可作用于脊椎動物zhong樞神經(jīng)系統(tǒng)的谷氨酸
受體,可直接興奮神經(jīng)元,又可增強鈉離子的通透性而使神經(jīng)細胞去極化,誘dian癰發(fā)生。KA的人工合成品即合成紅藻氨酸( synthetical kainic acid,SKA) 腹腔注she。發(fā)作階段性明顯,行為學(xué)表現(xiàn)規(guī)律、穩(wěn)定,si亡率低,適宜大規(guī)模建模。大鼠的胰管與膽管匯集于一個總管,在其入腸處插管固定,并在近肝門處結(jié)扎和另行插管,可分別收集到胰液和膽汁。
2.注she氯化鋰_.匹羅卡品致大鼠癲xian模型近年來一直被認為是研究顳葉dian癇的理想模型。
3.穿刺注she海人酸杏仁核點燃大鼠癲xian模型
4.急性氯化鐵dian癇模型
5.青mei素點燃模型
6.戍四唑點燃模型
類似人類失神癲xian特征,
7.戊si氮(PIZ)誘導(dǎo)的急、慢性癲xian
8.杏仁核點刺激點燃模型電極植入, 給予連續(xù)電剌激。
9.經(jīng)眼電刺激大鼠癲xian模型
4種肺動脈高壓(PH)動物模型肺血管重構(gòu)模式的差異
方法:雄性SD大鼠(350-400g),分別通過腹主動脈-腔靜脈分流(A-VF,n=10)、左肺切除(PE,n=10)、野百合堿注she(MCT,n=10)、左肺切除+MCT(PE+MCT,n=12)4種方法建立PH模型.檢測平均肺動脈壓力、RV/(LV+S)重量比值、肺小動脈中膜厚度百分比(WT%)、無肌性動脈肌化程度和新生內(nèi)膜(neointima)形成、新生內(nèi)膜增殖度和血管阻塞計分(VOS).
結(jié)果:在PE+MCT組(肺切除術(shù)后5周,MCT注she后4周)右肺腺泡內(nèi)血管出現(xiàn)了新生內(nèi)膜病變,其它組均沒有新生內(nèi)膜病變形成.PE+MCT組的動物出現(xiàn)了嚴(yán)重的右心室肥大,動脈中膜明顯增厚,平均肺動脈壓和無肌性血管肌化程度顯著增加;A-VF、PE和MCT組僅形成輕-中度的右心室肥大、和小動脈肌化.結(jié)論:左肺切除聯(lián)合應(yīng)用MCT能成功誘導(dǎo)大鼠PH新生內(nèi)膜模型,該模型能更好地模擬人類嚴(yán)重PH的病理改變,是研究梗阻性PH更為適用的動物模型.