7分鐘前 商洛293t細胞來電洽談 英瀚斯[英瀚斯2eefa30]內容：Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測試劑。WST-8【化學名：2-(2-甲氧ji-4-硝ji苯ji)-3-(4-硝ji苯ji)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，是一種類似于MTT的化合物，它在電子載體1-甲氧ji-5-甲ji吩嗪鎓硫酸二jia酯（1-Methoxy PMS）存在的情況下，被線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物（formazan）。細胞增殖越多越快，顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺，對于同樣的細胞，顏色的深淺與活xi胞的數(shù)量成正比，因此可利用這一特性直接進行細胞增殖和毒性分析。細胞實驗介紹——細胞運動能力檢測：細胞劃痕實驗是體外模擬細胞遷移能力和修復能力快捷的檢測方法。

細胞培養(yǎng)中常見的污染及解決方法

原生動物污染

原生動物污染后，細胞培養(yǎng)基變得輕微渾濁。在顯微鏡下，大量的小點來回移動。雖然此時細胞仍能生長，但繁殖速度減慢，細胞生長狀態(tài)不好，邊緣不清，變得不透明。原生動物與細胞形成共生關系。(autophagicvacuoloAV)2、在熒光顯微鏡下采用GFP-LC3融合蛋白來示蹤自噬形成由于電鏡耗時長，不利于監(jiān)測(Monitoring)自噬形成，人們利用LC3在自噬形成過程中發(fā)生聚集的現(xiàn)象開發(fā)出了此技術。同時，原生動物與細胞競爭營養(yǎng)。這種共生現(xiàn)象非常普遍，但以細胞為主，因為原生動物的數(shù)量相對較少，因而對細胞的正常生長沒有影響，只有當它們達到一定數(shù)量時，才終爆發(fā)成為循環(huán)。

解決方法：原生動物污染的原因有很多，如液體消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等，如果細胞足夠，果斷丟棄被污染的細胞和復蘇細胞。如果要保留，需要購買使用相關的滅菌試劑。

4.各種細胞對凍存速度的要求也不一樣；上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些，－2~－3℃/ 分鐘合適；胚胎細胞耐受性較小，不宜太快。總之在一開始時，下降速度不能超過－10℃/ 分鐘。

5.用什么防護劑合適和用量多大，要依細胞而定，初代培養(yǎng)細胞用 DMSO 較好，一般細胞可用甘油；用量以較小為好。有人認為膚上皮細胞貯存在 20%-30% 甘油中很好。

6.原則上細胞在液氮中可貯存多年，但為妥善起見，凍存一年后，應再復蘇培養(yǎng)一次，然后再繼續(xù)凍存。

7. 將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作，以免

8. 注意自身的安全，對于來自人源性或病毒的細胞株應特別小心。操作過程中，應避免引起氣溶膠的產(chǎn)生，小心有毒性試劑例如 DMSO，并避免尖銳物品傷人等。